PCR檢測(cè)試劑盒有效期一般為1年，這是指在適當(dāng)?shù)膬?chǔ)存溫度下。核酸擴(kuò)增部分的試劑一般要貯存于-20℃下，產(chǎn)物檢測(cè)部分試劑則貯存于2-8℃。盡量避免反復(fù)凍融。深圳

產(chǎn)品名稱：血竭LAMP鑒定試劑盒

英文名稱：Sanguis draxonis

產(chǎn)品貨號(hào)：LZ-P3136

分類：PCR檢測(cè)試劑盒

儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。

【結(jié)果分析條件設(shè)定】

u 基線（Baseline）設(shè)定：應(yīng)選擇該次實(shí)驗(yàn)指數(shù)擴(kuò)增前所有樣本熒光信號(hào)比較穩(wěn)定的一段區(qū)域（所有樣本熒光信號(hào)無(wú)較大波動(dòng)），起始點(diǎn)（Start）應(yīng)避開(kāi)熒光采集起始階段的信號(hào)波動(dòng)，終止點(diǎn)（End）應(yīng)比早出現(xiàn)指數(shù)擴(kuò)增的樣本Ct值減少1~3個(gè)循環(huán)，建議基線設(shè)為6~15。

u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值線設(shè)定在剛好超過(guò)正常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增曲線的高點(diǎn)。

【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】

1.   陰性質(zhì)控品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為陰性，無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無(wú)Ct；

2.   陽(yáng)性質(zhì)控品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為陽(yáng)性，有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期，Ct值應(yīng)小于等于35；

3.   以上要求需在一次實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿足，否則該次實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。

【結(jié)果判斷】

1.   陽(yáng)性：有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期，且Ct＜38；

2.可疑：有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可疑樣本；對(duì)于可疑樣本建議復(fù)核一次，若復(fù)核結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增期，則判定為陽(yáng)性，否則判定為陰性；

3.   陰性：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無(wú)Ct值均判定為陰性樣本。

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

　　　①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

　　?、趬A基配對(duì)原則；

　　　③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；

　　?、馨谢虻奶禺愋耘c保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。深圳

(2) 血竭LAMP鑒定靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。

(3) 簡(jiǎn)便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無(wú)放射性污染、易推廣。

(4) PCR檢測(cè)試劑盒對(duì)標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠結(jié)蛋白(Des)PCR檢測(cè)試劑盒 ， Des ELISA Kit

大鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)ELISA檢測(cè)試劑盒RatProstaticAcidPhosphatase,PAPELISAKit

人促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)試劑盒 human coicoopin releasing hormone,CRH ELISA Kit

RatSolubleClusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISAKit大鼠可溶性CD40配體(sCD40L)PCR檢測(cè)試劑盒

HRP反應(yīng)終止緩沖液100毫升

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兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA

Human thrombin activatable fibrinolysis inhibitor / thrombin activatable fibrinolysis inhibitor (TAFI)ELISA Kit 人纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)PCR檢測(cè)試劑盒

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Humandeoxyuridineiphate,DPPCR檢測(cè)試劑盒人脫氧尿三0酸(DP)PCR檢測(cè)試劑盒

組織LYNB激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

HumanPlaceaCadherin，P-cadELISAKit人P鈣黏蛋白/胎盤(pán)鈣黏蛋白(P-cad)PCR檢測(cè)試劑盒

血竭LAMP鑒定試劑盒Alpha-Fodrin IgG/IgA(Human anti-alpha-Fodrin IgG/IgA) ELISA Kit 人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgAMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Phospho-Insulin Receptor Beta(Tyr1345) 0酸化受體β抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Listeria tropina 李斯特菌菌體蛋白抗體 規(guī)格 1ml

Apo C3(Human Apolipoprotein C3) ELISA Kit 人載脂蛋白C3 96T

RNF74 英文名稱： 環(huán)指蛋白74抗體(重組激活基因1) 0.1ml

C12ORF50 英文名稱： 12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框50抗體 0.2ml

Anti-Phospho-Insulin Receptor Beta(Tyr1345) 0酸化受體β抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

PCR檢測(cè)步驟:

1血竭LAMP試劑盒、樣品處理

1）按照GB 4789.10-2016（或SN/T 1870-2016），取樣品25g（mL），加入到含有225mL 7.5% NaCl肉湯的無(wú)菌容器中均質(zhì)，調(diào)節(jié)pH至6.8±0.2。

2）36±1℃培養(yǎng)18-24h。

注：也可參考其他地方標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行樣品的前處理。

2、核酸提取

1）取40μL增菌液于裂解液管中，98℃或沸水浴10min。

2）冷卻至室溫，吸取上清備用或者置于-20℃保存。

3、反應(yīng)體系配置

從試劑盒中取出SA預(yù)混液，充分融化，短暫離心，然后將陰性對(duì)照、樣品的DNA提取液、陽(yáng)性對(duì)照各取5μL分別加入PCR管中，蓋好管蓋，短暫離心，立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。

4、PCR擴(kuò)增

PCR管置于PCR儀上，推薦反應(yīng)程序設(shè)定如下：反應(yīng)體系為25μL，在第二步每個(gè)循環(huán)60℃時(shí)檢測(cè)熒光信號(hào)，檢測(cè)通道選擇FAM。

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  大鼠趨化因子(C-X-C基序)配體1(CXCL1)單克隆抗體

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  豬腫瘤壞死因子α(TNFa)單克隆抗體

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  綿羊腫瘤壞死因子α(TNFa)單克隆抗體

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  人趨化素(CHEM)單克隆抗體

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  大鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)單克隆抗體

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