產(chǎn)品介紹:
產(chǎn)品名稱:通草探針法PCR鑒定試劑盒
英文名稱:Medulla tetrapanacis
產(chǎn)品貨號:LZ-P2842
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光。
有效期:一年
實驗步驟:
一.樣品制備
1.PCR擴增并檢測。根據(jù)不同的引物挑選適合的退火溫度進行PCR擴增。擴增產(chǎn)物用2-2.5%的瓊脂糖膠跑水平電泳檢測,上樣量3-5ul。PCR產(chǎn)物為10ng/nl左右為佳。上海
2.PCR產(chǎn)物與變性buffer混合。在干凈的PCR管底部加入5ul SSCP上樣緩沖液(變性緩沖液,同《分子克隆》中的測序緩沖液),然后在緩沖液中央加入PCR擴增產(chǎn)物。按照經(jīng)驗,擴增效果在瓊脂糖膠上能看出比較亮的帶的樣品加1ul,效果很好加0.5ul,如果不太好就適當增加1.5、2或3不等,同時加大上樣緩沖液的量,比如加3ul的PCR產(chǎn)物,緩沖液加到8ul變性效果更好。
3.PCR產(chǎn)物變性。加好的樣品進行離心,使樣品集中在管底。PCR儀上95℃變性10分鐘,立即取出PCR產(chǎn)物連同架子一同置于冰上靜置5min,以免變性的產(chǎn)物復性。
如何進行 PCR 實驗?
一、通草探針法PCR準備實驗材料(1)DNA模板:包含你想要復制的DNA區(qū)域。(2)引物:短的單鏈DNA片段,用于指導DNA合成的起始位置。(3)DNA聚合酶:一種酶,用于合成DNA。(4)四種脫氧核苷酸(dNTPs):DNA的構(gòu)建塊。(5)緩沖液:提供適宜的反應環(huán)境。(6)鎂離子或其它必需的離子:通常作為DNA聚合酶的輔助因子。 二、設定反應混合物將所有材料混合在微量離心管中?;旌衔锏目傮w積通常在20-50微升之間。
3. PCR程序(1)將混合物放入PCR機(熱循環(huán)儀)中,并設定程序。PCR程序通常包括以下階段:通草探針法試劑盒(2)初次變性:加熱至94-98°C,持續(xù)幾分鐘,使DNA雙鏈解開成單鏈。(3)循環(huán)步驟(通常進行30-40次循環(huán)):(4)變性階段:加熱至94-98°C,持續(xù)20-30秒,使DNA雙鏈解開。(5)退火階段:降溫至50-65°C,持續(xù)20-40秒,允許引物與模板DNA結(jié)合。(6)延伸階段:加熱至72°C,持續(xù)1分鐘每1千個堿基,以便DNA聚合酶合成新的DNA鏈。(7)后延伸:在72°C下持續(xù)5-10分鐘,確保所有可用的DNA模板都被復制。(8)保持階段:將溫度降至4-15°C,直到用戶準備取出樣品。
小鼠Klotho蛋白(KL)PCR檢測試劑盒 , KL ELISA Kit
人糖原合成酶激酶(GSK)ELISA檢測試劑盒Humanglycogensyhasekinase,GSKELISAKit
大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)試劑盒 Rat Bone morphogenetic protein receptor Ⅱ,BMPR-Ⅱ ELISA Kit
CLIAKitforVZV-IgM(HumanVaricellazostervirusIgMELISAKit人水痘帶狀皰疹病毒IgM規(guī)格:48T/96T
羅丹明123(RHODANMINE123)溶液(50微摩爾)0.5毫升
ELISAKitIgA人A規(guī)格:48T/96T
人抗巨噬細胞抗體(ai-macrophage Ab)ELISA
小鼠巨噬細胞炎性蛋白5(MIP-5)試劑盒 Mouse macrophage inflammatory protein 5,MIP-5 ELISA Kit
游離前列腺特異性抗原(fPSA)PCR檢測試劑盒 , fPSA ELISA Kit
MHCPCR檢測試劑盒魚類主要組織相容性復合體
ELISAKitCr小鼠骨膠原交聯(lián)規(guī)格:48T/96T
HumanActivinA,ACV-AELISAKit人活化素A(ACV-A)PCR檢測試劑盒
通草探針法PCR鑒定試劑盒大鼠的血清白蛋白殘留檢測ELISA Kit 大鼠的血清白蛋白殘留檢測Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-VAP1 血管粘附蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh GATA-3 GATA結(jié)合蛋白3抗體 規(guī)格 0.1ml
BDNF(Human Brain derived neurotrophic facor) ELISA Kit 人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子 96T
phospho-NF1(Ser2817) 英文名稱: 0酸化1型神經(jīng)纖維瘤抗體 0.1ml
ARHGAP32 英文名稱: Rho GTP酶激活蛋白32抗體 0.2ml
Anti-VAP1 血管粘附蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
PCR實驗的基本步驟:
DNA聚合酶是實驗室中常用的生物學酶之一,在PCR實驗中具有重要的作用。實驗室常用的DNA聚合酶,包括Taq聚合酶、Pfu聚合酶和Tth聚合酶。
一、Taq聚合酶:
Taq聚合酶是由Thermus aquaticus細菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶,在分子生物學研究中得到廣泛應用。Taq聚合酶具有熱穩(wěn)定性,可以在高溫條件下保持活性,這是由于其來源于熱液生物,能夠存活和正?;顒佑诟邷丨h(huán)境。這使得Taq聚合酶在聚合酶鏈式反應(PCR)中起到關(guān)鍵的作用。Taq聚合酶能夠按照DNA模板合成新的DNA鏈,因此在PCR中用于擴增目標DNA片段。然而,Taq聚合酶缺乏3'-5'外切酶活性,導致其生成的PCR產(chǎn)物末端容易出現(xiàn)額外的腺嘌呤堿基。因此,在某些應用中,需要使用具有外切酶活性的聚合酶。
二、Pfu聚合酶:
PCR法Pfu聚合酶是由Pyrococcus furiosus細菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶。與Taq聚合酶相比,Pfu聚合酶具有更高的熱穩(wěn)定性和耐酶性。這使得Pfu聚合酶在高溫PCR反應中表現(xiàn)出色,其高度穩(wěn)定的酶活性能夠確保PCR反應的可靠性和準確性。此外,Pfu聚合酶還具有3'-5'外切酶活性,可以修復并糾正PCR反應中的腺嘌呤堿基誤配,有效防止誤差累積。因此,Pfu聚合酶適用于需要高度準確的PCR擴增和DNA測序。
三、Tth聚合酶:
Tth聚合酶是由Thermus thermophilus HB8細菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶。與Taq聚合酶和Pfu聚合酶不同,Tth聚合酶具有熱活性反轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄酶活性,可以將RNA模板合成相應的DNA鏈。因此,Tth聚合酶在逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)中得到廣泛應用,用于將RNA轉(zhuǎn)錄成DNA,并通過增加熱活性酶來實現(xiàn)PCR擴增。此外,Tth聚合酶還具有一定的外切酶活性,可用于修復和校正PCR產(chǎn)物的末端。
小鼠子宮頸上皮細胞
3634元
產(chǎn)品名:子宮頸上皮細胞規(guī)格,子宮頸上皮細胞價格,子宮頸上皮細胞培養(yǎng),子宮頸上皮細胞型號
小鼠棕色脂肪細胞
3634元
產(chǎn)品名:小鼠棕色脂肪細胞規(guī)格,小鼠棕色脂肪細胞型號,小鼠棕色脂肪細胞價格,小鼠棕色脂肪細胞品牌
人線粒體DNA11778位點突變PCR測定試劑盒
4490元
產(chǎn)品名:人線粒體DNA11778,PCR測定試劑盒
人核糖核酸酶P基因PCR測定試劑盒
4490元
產(chǎn)品名:人核糖核酸酶P基因,PCR測定試劑盒
人肥胖易感基因825TPCR測定試劑盒
4490元
產(chǎn)品名:人肥胖易感基因825T,PCR測定試劑盒
金黃色葡萄球菌萬古霉素耐藥基因PCR測定試劑盒
4490元
產(chǎn)品名:萬古霉素耐藥基因PCR,PCR測定試劑盒
甲、乙型流感病毒2聯(lián)PCR測定試劑盒
4490元
產(chǎn)品名:甲、乙型流感病毒,PCR測定試劑盒
金黃色葡萄球菌甲氧西林耐藥基因PCR測定試劑盒
4490元
產(chǎn)品名:甲氧西林耐藥基因PCR,PCR檢測試劑盒