慶大霉素瓊脂培養(yǎng)基
貨號(hào):LZ-PYJ3932
英文名稱:Gentamycin Agar
產(chǎn)品規(guī)格:250g
用途:用于弧菌的分離培養(yǎng)。
添加劑:每瓶需配套添加1盒1%溶液使用。
成分(g/L):
蛋白胨 10.0
牛肉浸粉 3.0
亞鈉 3.0
氯化鈉 5.0
枸櫞酸鈉 10.0
蔗糖 10.0
慶大250IU
瓊脂 15.0
pH值8.3-8.7 25℃
用法:稱取本品56.0g,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中,冷至50℃左右時(shí),加入無菌1%溶液0.5ml,混勻,傾入無菌平皿,備用。無需高壓滅菌。
配制過程中的常見問題分析:
01 培養(yǎng)基顏色不正確
(1)含有酸堿指示劑的培養(yǎng)基,若顏色不正確,通常是由于pH不正確導(dǎo)致的,加熱過度、錯(cuò)誤的滅菌方式等都會(huì)導(dǎo)致此項(xiàng)問題。
(2)加熱過度導(dǎo)致某些成分分解或糖焦化,如SC培養(yǎng)基(SC增菌液)加熱過度會(huì)變紅,含糖量高的培養(yǎng)基,加熱過度通常會(huì)出現(xiàn)顏色加深,呈焦糖色或棕褐色。
(3)某些成分變質(zhì),如血液久置易變黑,制成的平板顏色偏棕黑色。
02 培養(yǎng)基不凝固或凝固性差
(1)顆粒培養(yǎng)基稱量錯(cuò)誤
(2)瓊脂分布不均勻
(3)培養(yǎng)基pH不正確
(4)培養(yǎng)基加熱過度
(5)瓊脂量不足
03 培養(yǎng)基產(chǎn)生沉淀
(1)某些培養(yǎng)基原本就含有不溶性沉淀,如TTB,MC培養(yǎng)基等,配方中含有大量不溶性碳酸鈣。
(2)滅菌前未充分溶解,若滅菌前溶解不充足,滅菌后就會(huì)出現(xiàn)大量沉淀。
(3)pH不正確,偏酸或偏堿都有可能使培養(yǎng)基中的部分金屬離子產(chǎn)生沉淀。
(4)水的純度不夠,天然水中含有較多的礦物鹽離子,若未除凈,則易與培養(yǎng)基中反應(yīng)生成沉淀。
(5)添加劑加入溫度不正確,卵黃、血液等對(duì)溫度敏感的添加成分,若加入時(shí)溫度過高或溫差過大,易出現(xiàn)凝塊。
(6)稱量錯(cuò)誤。
(7)試劑加入順序不正確。
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慶大霉素瓊脂培養(yǎng)基DMEM/F-12培養(yǎng)基(不含HEPES) DMEM/F-12(without HEPES) 500mL
DMEM無糖培養(yǎng)基(含L-丙氨酰-L-) DMEM without glucose(with Ala-Gln) 500mL
DMEM無糖培養(yǎng)基(不含L-) DMEM without glucose(without L-glutamine) 500mL
注意事項(xiàng):
1)培養(yǎng)基盡量使用新鮮培養(yǎng)基,2~4h內(nèi)用完;
2)上海應(yīng)使用預(yù)還原培養(yǎng)基,預(yù)還原24~48h更好;
3)可采用預(yù)還原滅菌法制作的培養(yǎng)基(用前于培養(yǎng)基中加入還原劑,如L-半胱氨酸、維生素C等,盡可能使預(yù)還原劑處于還原狀態(tài));
4)液體培養(yǎng)基應(yīng)煮沸10min,以驅(qū)除溶解氧,并迅速冷卻,立即接種醫(yī)。學(xué)教育網(wǎng)搜集整理;
5)厭氧菌的培養(yǎng)基均應(yīng)營養(yǎng)豐富,并加有還原劑與生長(zhǎng)刺激因子(血清、維生素K、氯化血紅素、聚山梨酯-80等)。